分泌IL-15的GPC3 CART治疗实体瘤

白细胞介素-15（IL-15）能够促进T淋巴细胞的存活，增强嵌合抗原受体（CAR）T细胞对抗实体瘤的特性，已临床前模型中验证。

Glypican-3（GPC3）在一组实体瘤中表达，这项研究报告两个队列，第一队列12例患者（NCT02905188和NCT02932956）接受了GPC3 CAR T细胞，这些细胞安全但未产生客观的抗肿瘤反应。第二队列12例患者（NCT05103631和NCT04377932）接受了 共表达IL-15的GPC3 CAR T细胞（15.CAR），这显著增加了体内CART细胞扩增，并诱导了66%的疾病控制率DCR和33%的抗肿瘤反应率ORR 。总的来说，IL-15增加了GPC3 CAR T细胞在患者中的扩增、肿瘤内存活和抗肿瘤活性。

主要结果

1、GPC3表达评估：免疫组织化学法检测GPC3表达

GPC3在儿童肝母细胞瘤和胎盘组织阵列样本中的表达作为阳性对照

GPC3在正常组织中不表达，特别是在非恶性组织中，这使得它成为一个理想的免疫治疗靶点，可以减少对正常组织的不良影响。研究者在儿童中也确认了GPC3的不表达，进一步支持了其作为治疗靶点的安全性。

B:患者15的入组样本示例

2、患者筛选、入组

3、CART的特征与回输

2、15.GPC3 CART细胞在患者中诱导显著的抗肿瘤反应

1. 不同患者（15.CAR 1、15.CAR 4、15.CAR 7、15.CAR 9和15.CAR 12）在接受CAR T细胞输注前后的影像学图像。这些图像包括胸部CT（计算机断层扫描）、腹部MRI（磁共振成像）和PET-CT（正电子发射断层扫描）。红色箭头和圆圈表示肿瘤，数字代表肝脏肿瘤的标准摄取值（SUV）。这些图像直观地显示了治疗前后肿瘤的变化。

2. 瀑布图（Waterfall plot）显示肿瘤体积的变化。红色虚线代表20%的增加，蓝色虚线代表20%的减少，绿色虚线代表30%的减少。这个图表直观地显示了治疗后肿瘤体积的客观变化，包括部分缓解（PR）和疾病稳定（SD）。

3. 两个对AFP（甲胎蛋白）分泌肿瘤有反应的患者，在指定时间点的血清AFP浓度。AFP是一种肿瘤标志物，其水平的显著降低通常表明肿瘤负荷的减少。

4. 患者15.CAR 9的肿瘤活检样本，使用HE染色在输注前后的对比。左侧是输注前的样本，右侧是输注后的样本。图像显示了患者肝肿瘤的近完全坏死。

以上影像学变化、肿瘤体积的客观变化、肿瘤标志物的降低以及肿瘤组织的病理学变化，表明15.CAR T细胞治疗在实体瘤患者中具有抗肿瘤活性。

3、CAR或15CAR T细胞输注前产品和输注后体内扩增的比较

4、有效与无效患者输注后肿瘤浸润15CART细胞单细胞基因表达谱的比较

5、CART治疗患者的抗肿瘤反应特征

a: 长期随访结果，包括那些达到无病生存（ANED）的患者以及需要使用iC9安全开关控制CART活性的患者。图中还标注了存活有病（AWD）和因病死亡（DOD）的患者。

b: 瀑布图 显示了从基线到治疗后AFP浓度的变化。 展示了在接受CAR T细胞治疗的患者中，具有AFP分泌功能的肿瘤患者血清中AFP浓度的变化。

c:比较了根据RECIST标准，非响应者（NR）和响应者（R）之间的差异表达细胞因子。

d:比较了在响应者（R, n=4）和非响应者（NR, n=14）患者中，至少有两倍统计学意义增加的个别细胞因子。这个图表进一步细化了在R和NR患者中，特定细胞因子的表达差异。

e:比较了响应者（R, n=4）和非响应者（NR, n=14）患者的肿瘤GPC3表达。

没有检测到响应者和非响应者之间GPC3表达水平的显著差异，GPC3的表达水平似乎并不是影响患者对15.CAR T细胞治疗反应的显著预测因素

7、24例患者基线

不同类型的GPC3阳性肿瘤，包括肝细胞癌（HCC）、肝细胞肿瘤未特指（HC-NOS）、卵黄囊瘤（YST）、Wilms瘤（WT）、胰腺神经内分泌肿瘤（NET）和胚胎性横纹肌肉瘤（ERMS）。

小结

单次注射15CAR - T细胞是安全的，且提高了实体瘤患者抗肿瘤反应率和体内扩增。此外，肿瘤内15.CAR T细胞中FOS/JUN和T1IFN途径相关基因的表达增加，以及SWI/SNF活性的下调，与治疗反应相关。

参考文献：

Steffin D, Ghatwai N, Montalbano A, et al. Interleukin-15-armoured GPC3 CAR T cells for patients with solid cancers. Nature. Published online November 27, 2024. doi:10.1038/s41586-024-08261-8.